Peroxidasa (fuente de rábano picante) Sinónimo: peróxido de hidrógeno oxidorreductasa;HRP

La peroxidasa de rábano picante (HRP) se aísla de las raíces del rábano picante (Amoracia rusticana) y pertenece al grupo de peroxidasas de ferroprotoporfirina.El HRP se combina fácilmente con el peróxido de hidrógeno (H2O2).El complejo resultante [HRP-H2O2] puede oxidar una amplia variedad de donantes de hidrógeno:
Donante + H2O2 → Donante oxidado + 2 H2O
HRP oxidará varios sustratos (ver Tabla 1):
• Cromogénico
• Quimioluminiscentes (como luminol o isoluminol)
• Fluorogénicos (como tiramina, ácido homovanílico o ácido 4-hidroxifenilacético)
HRP es un polipéptido de cadena sencilla que contiene cuatro puentes disulfuro.HRP es una glicoproteína que contiene un 18% de carbohidratos.La composición de carbohidratos consta de galactosa, arabinosa, xilosa, fucosa, manosa, manosamina y galactosamina, dependiendo de la isozima específica.

HRP es un marcador ampliamente utilizado para inmunoglobulinas en muchas aplicaciones de inmunoquímica diferentes, incluidas inmunotransferencia, inmunohistoquímica y ELISA.La HRP se puede conjugar con anticuerpos mediante varios métodos diferentes, incluido el glutaraldehído, la oxidación del peryodato, a través de enlaces disulfuro y también mediante entrecruzadores dirigidos por amino y tiol.HRP es el marcador más deseado para los anticuerpos, ya que es el más pequeño y estable de los tres marcadores enzimáticos más populares (peroxidasa, β-galactosidasa, fosfatasa alcalina) y su glicosilación conduce a una menor unión no específica.Se ha publicado una revisión de los métodos de conjugación de glutaraldehído y periodato.

La peroxidasa también se utiliza para la determinación de glucosa4 y peróxidos en solución.Varias publicaciones, 6 a 24 tesis, 25 a 29 y disertaciones 30 a 46, han citado el uso de P8375 en sus protocolos de investigación.