Fosfatasa Alcalina (ALP)
Descripción
La fosfatasa alcalina se deriva de una cepa recombinante de E. coli que porta el gen TAB5.La enzima cataliza la desfosforilación de los extremos 5' y 3' de los fosfomonoésteres de ADN y ARN.Además, hidroliza la ribosa, así como los desoxirribonucleósidos trifosfato (NTP y dNTP).La Fosfatasa Alcalina TAB5 actúa en los extremos 5' salientes, 5' empotrados y romos.La fosfatasa se puede utilizar en muchas aplicaciones de biología molecular, como la clonación o el etiquetado de extremos de sondas para eliminar los extremos fosforilados del ADN o el ARN.En los experimentos de clonación, la desfosforilación evita que el ADN plasmídico linealizado se autolige.También puede degradar dNTP no incorporados en reacciones de PCR para preparar una plantilla para la secuenciación de ADN.La enzima se inactiva completa e irreversiblemente calentándola a 70 °C durante 5 minutos, lo que hace innecesaria la eliminación de la fosfatasa antes de la ligación o el marcaje final.
Uso
1.La fosfatasa alcalina acoplada a proteínas (anticuerpos, estreptavidina, etc.) puede identificar específicamente moléculas objetivo y puede usarse en ELISA, WB y detección histoquímica;
2. La fosfatasa alcalina se puede utilizar para desfosforizar el terminal 5 'del ADN o ARN para evitar la autounión;
3. El ADN o ARN desfosforilado anterior se puede marcar con fosfatos radiomarcados (a través de la polinucleótido quinasa T4)
Estructura química
Especificación
| Artículos de prueba | Especificaciones |
| Actividad enzimática | 5U/μL |
| Actividad de endonucleasa | No detectado |
| Actividad de exonucleasa | No detectado |
| Actividad de mella | No detectado |
| Actividad de la ARNasa | No detectado |
| ADN de E. coli | ≤1copia/5U |
| endotoxina | Prueba LAL, ≤10EU/mg |
| Pureza | ≥95% |
Transporte y almacenamiento
Transporte:Ambiente
Almacenamiento :Conservar a 2-8°C
Nueva prueba recomendadaVida:2 años
