2 × Súper mezcla rápida de Taq
Número de gato: HCR2016A
2×Rapid Taq Super Mix se basa en la ADN polimerasa Taq modificada, agregando un fuerte factor de extensión, un factor de mejora de la amplificación y un sistema tampón optimizado, con una eficiencia de amplificación súper alta.La velocidad de amplificación de plantillas complejas como el genoma dentro de 3 kb alcanza 1-3 segundos/kb, y la de plantillas simples como plásmidos dentro de 5 kb alcanza 1 segundo/kb.Este producto puede ahorrar mucho tiempo de reacción de PCR.Al mismo tiempo, la mezcla contiene dNTP y Mg2+, que sólo pueden amplificarse añadiendo cebadores y plantillas, lo que también simplifica enormemente los pasos operativos del experimento.Además, la mezcla contiene colorante indicador electroforético, que puede someterse a electroforesis directamente después de la reacción.El agente protector de este producto hace que la mezcla mantenga una actividad estable después de repetidas heladas y descongelaciones.La banda A del extremo 3' del producto de PCR se puede clonar fácilmente en el vector T.
Componentes
2 × Súper mezcla rápida de Taq
Condiciones de almacenaje
Los productos PCR Master Mix deben almacenarse a -25 ~ -15 ℃ durante 2 años.
Especificaciones
Especificaciones del producto | Súper mezcla rápida de Taq |
Concentración | 2× |
Arranque en caliente | Arranque en caliente incorporado |
Sobresalir | 3′-A |
Velocidad de reacción | Rápido |
Tamaño (producto final) | Hasta 15kb |
Condiciones de transporte | Hielo seco |
Instrucciones
1. Sistema de reacción (50 l)
Componentes | Tamaño (μL) |
Plantilla de ADN* | adecuado |
Cebador directo (10 μmol/L) | 2.5 |
Cebador inverso (10 μmol/L) | 2.5 |
2 × Súper mezcla rápida de Taq | 25 |
ddH2O | a 50 |
2.Protocolo de amplificación
Pasos del ciclo | Temperatura (°C) | Tiempo | Ciclos |
Predenaturación | 94 | 3 minutos | 1 |
Desnaturalización | 94 | 10 seg |
28-35 |
Recocido | 60 | 20 seg | |
Extensión | 72 | 1-10 segundos/kb |
Uso recomendado de diferentes plantillas:
tipo de plantilla | Rango de uso del segmento (sistema de reacción de 50 μL) |
ADN genómico o líquido de E. coli | 10 a 1000 ng |
ADN plasmídico o viral | 0,5-50 ng |
ADNc | 1-5 µL (no más de 1/10 del volumen total de la reacción de PCR) |
Uso recomendado de diferentes plantillas. |
Notas:
1.Uso del reactivo: descongelar completamente y mezclar antes de usar.
2. Temperatura de recocido: La temperatura de recocido es el valor Tm universal y también se puede establecer entre 1 y 2 ℃ por debajo del valor Tm del cebador.
3. Velocidad de extensión: establezca 1 segundo/kb para plantillas complejas como genoma y E. coli dentro de 1 kb;establezca 3 segundos/kb para plantillas complejas tales como genoma de 1-3 kb y E. coli;establezca 10 segundos/kb para plantillas complejas de más de 3 kb de genoma y E. coli.Puede establecer el valor en 1 s/kb para una plantilla simple, como un plásmido de menos de 5 kb, 5 s/kb para una plantilla simple, como un plásmido de entre 5 y 10 kb, y 10 s/kb para una plantilla simple. como un plásmido de más de 10 kb.
Notas
1. Para su seguridad y salud, use batas de laboratorio y guantes desechables durante la operación.
2. ¡Este producto es ÚNICAMENTE para uso en investigación!