Fosfatasa alcalina (ALP)

La fosfatasa alcalina se deriva de una cepa de E. coli recombinante que porta el gen TAB5.La enzima cataliza la desfosforilación de los extremos 5´ y 3´ de los fosfomonoésteres de ADN y ARN.Además, hidroliza la ribosa, así como los trifosfatos de desoxirribonucleósidos (NTP y dNTP).La fosfatasa alcalina TAB5 actúa en los extremos 5' salientes, 5' hundidos y romos.La fosfatasa se puede utilizar en muchas aplicaciones de biología molecular, como la clonación o el etiquetado de extremos de sondas para eliminar los extremos fosforilados de ADN o ARN.En los experimentos de clonación, la desfosforilación evita que el ADN del plásmido linealizado se autolige.También puede degradar los dNTP no incorporados en las reacciones de PCR para preparar una plantilla para la secuenciación del ADN.La enzima se inactiva completa e irreversiblemente calentando a 70°C durante 5 minutos, lo que hace innecesaria la eliminación de la fosfatasa antes de la ligadura o el marcaje final.