Bst 2.0 ADN Polimerasa (Sin glicerol, alta densidad)
La Bst ADN polimerasa V2 se deriva de la ADN polimerasa I de Bacillus stearothermophilus, que tiene actividad ADN polimerasa 5′→3′ y una fuerte actividad de reemplazo de cadena, pero no actividad exonucleasa 5′→3′.Bst DNA Polymerase V2 es ideal para desplazamiento de hebras, amplificación isotérmica LAMP (amplificación isotérmica mediada por bucle) y secuenciación rápida.Esta Bst ADN polimerasa V2 es capaz de inhibir la actividad de la ADN polimerasa a temperatura ambiente, por lo que se puede operar y formular el sistema de reacción a temperatura ambiente, evitando la amplificación no específica y mejorando la eficiencia de la reacción, y esta versión puede ser liofilizado.Además, es capaz de liberar su actividad a temperaturas elevadas, eliminando así la necesidad de un paso de activación independiente.
Componentes
| Componente | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ADN polimerasa V2 (sin glicerol) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| Tampón 10×HC Bst V2 | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10ml |
| MgSO4 (100 mm) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10ml |
Aplicaciones
1.Amplificación isotérmica LAMP
2.Reacción de desplazamiento único de una cadena de ADN
3.Secuenciación del gen GC alto
4.Secuenciación de ADN a nivel de nanogramos.
Condición de almacenamiento
Transporte por debajo de 0 °C y almacenamiento entre -25 °C y -15 °C.
Definición de unidad
Una unidad se define como la cantidad de enzima que incorpora 25 nmol de dNTP en un material insoluble en ácido en 30 minutos a 65°C.
Reacción de la lámpara
| Componentes | 25 µLSistema |
| Tampón 10×HC Bst V2 | 2,5 µL |
| MgSO4 (100 mm) | 1,5 µL |
| dNTP (10 mm cada uno) | 3,5 µL |
| SYTO™ 16 Verde (25×)a | 1,0 µL |
| Mezcla de imprimaciónb | 6 µL |
| Bst ADN Polimerasa V2 (Sin glicerol) (32 U/uL) | 0,25 µL |
| Plantilla | × µL |
| ddH₂O | Hasta 25 µL |
Notas:
1) a.SYTOTM 16 Verde (25×): Según las necesidades experimentales, se pueden utilizar otros tintes como sustitutos;
2) b.Mezcla de imprimación: obtenida mezclando 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB y otros volúmenes.
Reacción y condición
1 × tampón HC Bst V2, la temperatura de incubación está entre 60 °C y 65 °C.
Inactivación por calor
80°C, 20min.
