Hotstart Taq ADN polimerasa (5u/ul)
La ADN polimerasa Taq es una ADN polimerasa de arranque en caliente con doble bloqueo mediante anticuerpos dobles. Este producto no solo bloquea la actividad polimerasa 5′→3′ de la ADN polimerasa Taq, sino que también bloquea la actividad exonucleasa 5′→3′.Calentar durante 30 segundos a la temperatura previa a la desnaturalización puede inactivar completamente el anticuerpo y liberar la actividad de la ADN polimerasa y la actividad exonucleasa.La característica de doble bloqueo no sólo puede prevenir eficazmente la amplificación inespecífica causada por una falta de coincidencia o el dímero del cebador, sino que también inhibe eficazmente la disminución de la señal de fluorescencia causada por la degradación de la sonda, para hacer que el reactivo de detección in vitro sea más estable durante el transporte o el uso en ambiente. temperatura.
Componentes
Componente | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
ADN polimerasa Taq(5 U/μL) | 50 µL | 200 µL | 2 ml | 5ml |
Condición de almacenamiento
El producto se envía con hielo seco y se puede almacenar a -25°C~-15°C durante 2 años.
Especificaciones
polimerasa | ADN polimerasa Taq |
Pureza | ≥ 95% (SDS-PÁGINA) |
Arranque en caliente | Arranque en caliente incorporado |
Velocidad de reacción | Estándar |
Actividad exonucleasa | 5′→3′ |
Instrucciones
Configuración de reacción
Componentes | Volumen (µL) | Concentración final |
2× búfera | 25 | 1× |
Mezcla de cebador/sondab | × | 0,1 µmol/L-0,5 µmol/L |
Polimerasa Taq Hotstart (5U/μL) | 1.2 | 0,12 U/μL |
Plantilla de ADNc | × | 0,1-100 ng |
ddH2O | Hasta 50 | - |
Notas:
1) Según la aplicación experimental específica, es necesario preparar el tampón de reacción correspondiente.
2) La cantidad de ADN y la concentración de sondas o cebadores son concentraciones recomendadas.La concentración óptima se puede ajustar según las condiciones experimentales específicas.
Protocolo de ciclado térmico
Paso | Temperatura(°C) | Tiempo | Ciclos |
Predesnaturalización | 95℃ | 5 minutos | 1 |
Desnaturalización | 95℃ | 15 seg | 45 |
Recocido / Extensión | 60℃a | 30 segundosb |
Notas:
1) La temperatura de reacción se ajusta según el valor de Tm de los cebadores diseñados.
2) Los diferentes instrumentos qPCR necesitan un tiempo de adquisición de señal de fluorescencia diferente; configúrelo de acuerdo con el límite de tiempo más corto.
Notas
Utilice el EPP necesario, como bata de laboratorio y guantes, para garantizar su salud y seguridad.