Robusart Taq ADN polimerasa

Robustart Taq DNA Polymerase es una ADN polimerasa de arranque en caliente.Este producto no solo puede inhibir mejor la reacción no específica causada por la hibridación no específica de cebadores o la agregación de cebadores en el proceso de preparación y amplificación del sistema de PCR.Por lo tanto, tiene una especificidad excelente y es más eficaz para la amplificación de plantillas de baja concentración, y es adecuado para reacciones de amplificación por PCR multiplexada.Además, este producto tiene muy buena aplicabilidad y se pueden obtener resultados de amplificación estables en diferentes tipos de reacciones de PCR.

Componentes

1.5 U/μL ADN polimerasa Robusart Taq

2.10 × PCR Buffer II (libre de Mg²+) (opcional)

3.MgCl 25 mM₂(opcional)

* 10 × PCR Buffer II (sin Mg²+) no contiene dNTP ni Mg²+; agregue dNTP y MgCl₂al preparar el sistema de reacción.

Aplicaciones recomendadas

1.Amplificación rápida.

2.Amplificación múltiple.

3.Amplificación directa de sangre, hisopos y otras muestras.

4.Detección de enfermedades respiratorias.

Condición de almacenamiento

-20°C para almacenamiento a largo plazo, se debe mezclar bien antes de su uso, evitar la congelación y descongelación frecuente.

*Si se produce precipitación después de la refrigeración, es normal;se recomienda equilibrar a temperatura ambiente antes de mezclar y usar.

Definición de unidad

Una unidad activa (U) se define como la cantidad de enzima que incorpora 10 nmol de desoxirribonucleótido en material insoluble en ácido a 74 °C durante 30 minutos utilizando ADN de esperma de salmón activado como plantilla/cebador.

Control de calidad

1.Pureza electroforética SDS-PAGE superior al 98%.

2.Sensibilidad de amplificación, control lote a lote, estabilidad.

3.Sin actividad de nucleasa exógena, sin endonucleasa exógena o contaminación por exonucleasa

Instrucciones

Configuración de reacción

Notas:

1) a.El tampón no contiene dNTP ni Mg²+; agregue dNTP y MgCl₂al preparar el sistema de reacción.

2) b.Si se utiliza para qPCR/qRT-PCR, se deben agregar sondas fluorescentes al sistema de reacción.Normalmente, una concentración final de cebador de 0,2 µM dará buenos resultados;Si el rendimiento de la reacción es deficiente, la concentración del cebador se puede ajustar en el rango de 0,2 a 1 µM.La concentración de la sonda suele optimizarse en el rango de 0,1 a 0,3 µM.Se pueden realizar experimentos de gradiente de concentración para encontrar la mejor combinación de cebador y sonda.

Protocolo de ciclado térmico

Notas

1.La velocidad de amplificación de la ADN polimerasa rápida no debe ser inferior a 1 kb/10 s.La tasa de aumento y caída de temperatura, el modo de control de temperatura y la eficiencia de conducción de calor de diferentes instrumentos de PCR varían mucho, por lo que se recomienda optimizar las condiciones de reacción óptimas para el instrumento de PCR rápido específico.

2.El sistema es altamente adaptable, con mayor especificidad y sensibilidad.

3.Adecuado para su uso como reactivos de detección de PCR de alta sensibilidad y puede usarse en reacciones de amplificación de PCR múltiple.

4.actividad polimerasa 5′→3′, actividad exonucleasa 5′→3′;sin actividad exonucleasa 3′→5′;sin función de revisión.

5.Adecuado para pruebas cualitativas y cuantitativas de PCR y RT-PCR.

6.El extremo 3' del producto de la PCR es A, que puede clonarse directamente en un vector T.

7.El método de tres pasos se recomienda para cebadores con bajas temperaturas de hibridación o para amplificación de fragmentos de más de 200 pb.