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Imagen destacada Ultra Nucleasa HCP1013A
  • Ultranucleasa HCP1013A

Ultranucleasa


Número de gato: HCP1013A

Paquete: 20μL/200μL/2mL/20mL

UltraNuclease es una endonucleasa genéticamente modificada derivada de Serratia marcescens.

Descripción del Producto

Datos del producto

UltraNuclease es una endonucleasa genéticamente modificada derivada de Serratia marcescens, que es capaz de degradar ADN o ARN, ya sea bicatenario o monocatenario, lineal o circular en una amplia gama de condiciones, degradar completamente los ácidos nucleicos en oligonucleótidos 5'-monofosfato con una longitud de 3 a 5 bases. .Después de la modificación de ingeniería genética, el producto se fermentó, expresó y purificó en Escherichia coli (E. coli), lo que reduce la viscosidad del sobrenadante celular y del lisado celular en la investigación científica, pero también mejora la eficiencia de la purificación y la investigación funcional de las proteínas.También se puede utilizar en la terapia génica, la purificación de virus, la producción de vacunas y la industria farmacéutica de proteínas y polisacáridos como reactivo de eliminación de ácidos nucleicos residuales del huésped.


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  • Características del producto

    No CAS.

    9025-65-4

    CE No.

    3.1.30.2

    Peso molecular

    30kDa

    Punto isoeléctrico

    6,85

    Pureza de la proteína

    ≥99% (SDS-PÁGINA Y SEC-HPLC)

    Actividad específica

    ≥1.1×106U/mg

    Temperatura óptima

    37ºC

    pH óptimo

    8.0

    Actividad de proteasa

    negativo

    Carga biológica

    <10 UFC/100.000 U

    Proteína residual de la célula huésped

    ≤10 ppm

    Metal pesado

    ≤10 ppm

    Endotoxina bacteriana

    <0,25 UE/1000 U

    Búfer de almacenamiento

    Tris-HCl 20 mM, pH 8,0, MgCl2 2 mM, 20 mM

    NaCl, 50% glicerol

     

    Condiciones de almacenaje

    Transporte ≤0°C; -25~-15°C Almacenamiento, 2 años de validez (evite la congelación y descongelación).

     

    Definición de unidad

    La cantidad de enzima utilizada para cambiar el valor de absorción de △A260 en 1,0 en 30 minutos a 37 °C, pH 8,0, equivalente a 37 μg de ADN de esperma de salmón digerido mediante corte en oligonucleótidos, se definió como una unidad activa (U).

     

    Control de calidad

    Proteína residual de la célula huésped: kit ELISA

    proteasa Residuos: 250 KU/mL de UltraNuclease reaccionaron con el sustrato durante 60 minutos, no se detectó actividad.

    Endotoxina bacteriana: Prueba LAL, método de prueba de límite de gel de la Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (edición 2020).Reglas Generales (1143).

    Carga biológica: Farmacopea de la República Popular China Volumen 4 (Edición 2020): General

    Reglas para la prueba de esterilidad (1101), Estándar nacional de la República Popular China, GB 4789.2-2016.

    Metal pesado:ICP-AES, HJ776-2015.

     

    Operación

    La actividad UltraNuclease se inhibió significativamente cuando la concentración de SDS era superior al 0,1 % o EDTA.

    La concentración fue superior a 1 mM. Los surfactantes Triton X-100, Tween 20 y Tween 80 no tuvieron ningún efecto sobre la nucleasa.

    propiedades cuando la concentración era inferior al 1,5%.

    Operación

    Operación óptima

    Operación válida

    Temperatura

    37 ℃

    0-45℃

    pH

    8.0-9.2

    6,0-11,0

    Mg2+

    1-2 mm

    1-15 mm

    TDT

    0-100 mm

    >100 mm

    2-mercaptoetanol

    0-100 mm

    >100 mm

    Ion metálico monovalente

    (Na+, K+, etc.)

    0-20 mm

    0-200 mm

    PO43-

    0-10 mm

    0-100 mm

     

     Uso y dosificación

    • Eliminar el ácido nucleico exógeno de los productos vacunales, reducir el riesgo de toxicidad residual del ácido nucleico y mejorar la seguridad del producto.

    • Reducir la viscosidad del líquido de alimentación causada por el ácido nucleico, acortar el tiempo de procesamiento y aumentar el rendimiento de proteínas.

    • Eliminar el ácido nucleico que envuelve la partícula (virus, cuerpo de inclusión, etc.), lo cual es propicio

    a la liberación y purificación de la partícula.

     

    Tipo experimental

    Producción de proteínas

    virus, vacuna

    Drogas celulares

    Número de celdas

    1 g de peso húmedo de células

    (resuspendido con 10 ml de tampón)

    1L fermentación

    sobrenadante líquido

    1L de cultivo

    Dosis mínima

    250U

    100U

    100U

    Dósis recomendada

    2500U

    25000U

    5000U

     

    • El tratamiento con nucleasa puede mejorar la resolución y recuperación de la muestra para cromatografía en columna, electroforesis y análisis de transferencia.

    • En la terapia génica, se elimina el ácido nucleico para obtener virus adenoasociados purificados.

     

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