2×PCR Super Mix (con tinte)
2× PCR Master Mix contiene Taq ADN polimerasa, dNTP y otros componentes necesarios para la PCR.Master Mix es estable durante 3 meses a 4 ℃ con nuestros estabilizadores personalizados.La solución premezclada está optimizada para PCR convencional y lista para usar agregando plantilla de ADN y cebadores.Los productos de PCR se pueden cargar directamente para electroforesis con colorante azul de bromofenol precargado.Los productos amplificados contienen una protrusión 3'-dA y pueden clonarse fácilmente en el vector T.La mezcla maestra para PCR 2× simplifica el procedimiento de PCR y reduce la contaminación.
Condiciones de almacenaje
Los productos deben almacenarse entre -25 ℃ ~ -15 ℃ durante 2 años.
Especificaciones
| Fidelidad (frente a Taq) | 1× |
| Arranque en caliente | No |
| Sobresalir | 3'-A |
| polimerasa | ADN polimerasa Taq |
| Formato de reacción | SuperMix o Mezcla Maestra |
| Velocidad de reacción | Estándar |
| tipo de producto | Mezcla maestra de PCR (2x) |
Instrucciones
1.Sistema de reacción
| Componentes | Volumen(μL) |
| Plantilla de ADN | Adecuado |
| Cebador 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Cebador 2 (10 μmol/L） | 2 |
| Mezcla maestra de PCR 2× | 25 |
| ddH2O | a 50 |
2.Protocolo de amplificación
| Pasos del ciclo | Temperatura (°C) | Tiempo | Ciclos |
| Desnaturalización inicial | 94 | 5 minutos | 1 |
| Desnaturalización | 94 | 30 segundos | 35 |
| Recocido | 50-60 | 30 segundos | |
| Extensión | 72 | 30-60 segundos/kb | |
| Prórroga definitiva | 72 | 10 minutos | 1 |
Nota:
1) Uso de plantilla: 50-200 ng de ADN genómico;0,1-10 ng de ADN plasmídico.
2) magnesio2+Concentración: Este producto contiene 3 mM de MgCl2, adecuado para la mayoría de las reacciones de PCR.
3) Temperatura de recocido: consulte el valor teórico de Tm de los cebadores.La temperatura de recocido se puede establecer entre 2 y 5 ℃ por debajo del valor teórico de la imprimación.
4) Tiempo de extensión: Para identificación molecular se recomienda 30 seg/kb.Para la clonación de genes, se recomiendan 60 segundos/kb.
Notas
1.Los productos de PCR con 2× PCR Master Mix no son adecuados para la electroforesis en gel de poliacrilamida.
2.Para su seguridad y salud, use batas de laboratorio y guantes desechables para la operación.
3.¡Se utiliza ÚNICAMENTE para investigación!
