ADNasa I (Libre de ARNasa) (2u/ul)
Número de gato: HC4007B
La ADNasa I es una endonucleasa que puede digerir ADN monocatenario o bicatenario.Puede hidrolizar enlaces fosfodiéster para producir mono y oligodesoxinucleótidos que contienen un grupo 5'-fosfato y un grupo 3'-OH.El rango de pH de trabajo óptimo de la DNasa I es 7-8.La actividad de la DNasa I depende del Ca.2+y puede ser activado por iones metálicos divalentes como el CO2, manganeso2+, zinc2+, etc. En presencia de Mg2+, la ADNasa I puede escindir aleatoriamente cualquier sitio de ADN bicatenario;Mientras esté en presencia de Mn2+, La ADNasa I puede escindir el ADN de doble hebra en el mismo sitio, formando extremos romos o pegajosos con 1-2 nucleótidos que sobresalen.Puede utilizarse para el procesamiento de diversas muestras de ARN.
Componentes
| Nombre | 1KU | 5KU |
| DNasaI recombinante (libre de RNasa) | 500 µL | 5 × 500 μL |
| Tampón de reacción de ADNasa I (10×) | 1 mililitro | 5 × 1 ml |
Condiciones de almacenaje
Este producto debe almacenarse a -25~-15℃ durante 2 años.Evite el congelamiento y descongelamiento repetido.
Instrucciones
Se aplica a la eliminación de ADN de muestras de ARN únicamente como referencia.
1. Utilice tubos de centrífuga y puntas de pipeta sin ARNasa para preparar el siguiente sistema de reacción:
| Componentes | Volumen (μL) |
| Tampón de reacción de ADNasa I (10×) | 1 |
| ADNasel recombinante (libre de ARNasa) | 1 |
| ARN | X |
| ddH libre de ARNasa2O | Hasta 10 |
2. Las condiciones de reacción son las siguientes: 37 ℃, después de 15 a 30 minutos, agregar una concentración final de solución de EDTA 2,5 mM y mezclar bien, luego 65 ℃ durante 10 minutos.La plantilla procesada se puede utilizar para experimentos posteriores de RT-PCR o RT-qPCR, etc.
Notas
1. La DNasa l es sensible a la desnaturalización física;Al mezclar, invierta suavemente el tubo de ensayo yagite bien, no agite vigorosamente.
2. La enzima debe almacenarse en una hielera o en un baño de hielo cuando se use, y debe almacenarse a -20 ℃ inmediatamente después de su uso.
3. Este producto es sólo para uso en investigación.
4. Por su seguridad, opere con batas de laboratorio y guantes desechables.
