RT-LAMP Colorimétrico (Bola liofilizada)
Este producto contiene tampón de reacción, mezcla de enzimas RT (ADN polimerasa Bst y transcriptasa inversa resistente al calor), protectores liofilizados y componentes de colorantes cromogénicos.El producto es liofilizado tipo bola, utilizándose únicamente con primers y plantillas.Este kit proporciona una detección visual clara y rápida de la amplificación, cuya reacción negativa se indica en rojo y la reacción positiva se indica mediante un cambio a amarillo.
Componente
Mezcla maestra colorimétrica RT-LAMP (perlas liofilizadas)
Aplicaciones
Para amplificación isotérmica de ADN o ARN.
Condiciones de almacenaje
Transportado y almacenado a 2 ~ 8 ℃.El producto tiene una validez de 12 meses.
Protocolo
1.Saque el número correspondiente de polvo de perlas liofilizadas según el número de pruebas.
2.Preparar la mezcla de reacción
Componente | Volumen |
Mezcla maestra colorimétrica RT-LAMP (perlas liofilizadas) | 1 pieza (2 cuentas) |
10 × mezcla de imprimacióna | 5 µl |
Plantillas ADN/ARN b | 45 µL |
Notas:
1. Concentración de mezcla de cebador 10x: FIP/BIP 16 µM, F3/B3 2 µM, bucle F/B 4 µM;
2. Se recomienda disolver las plantillas de ácido nucleico con agua DEPC.
3.Incubar a 65°C durante 30-45 minutos, que se puede extender adecuadamente según el cambio de color. Tiempo de reacción.
4.A simple vista, el amarillo era positivo y el rojo negativo.
Notas
1.La temperatura de reacción se puede optimizar entre 62 ℃ y 68 ℃ según las condiciones del cebador.
2.Los reactivos envasados no deben exponerse al aire durante mucho tiempo.
3.La reacción de decoloración roja y amarilla depende del cambio de pH del sistema de reacción; no utilice la solución de almacenamiento de ácido nucleico Tris que contiene, se recomienda usar ddH2O ácido nucleico almacenado.
4.El experimento se llevará a cabo de manera estandarizada, incluida la preparación del sistema de reacción, el tratamiento de la muestra y la adición de la muestra.
5.Se sugiere preparar el sistema de reacción en la mesa ultralimpia y agregar plantillas en la campana extractora de otras salas para evitar falsos resultados.